វាដើរតួយ៉ាងសំខាន់ក្នុងដំណើរការជីវិត phosphorylating Tyrr, Ser, Thr ដែលមានទីតាំងនៅលើ peptides ។អាស៊ីតអាមីណូ phosphorylated ត្រូវបានគេប្រើជាទូទៅក្នុងការផលិត peptide អាស៊ីត phosphoric ដែលបច្ចុប្បន្នត្រូវបានគេប្រើនៅក្នុងអាស៊ីតអាមីណូ phenyl phosphorylated តែមួយ។អាស៊ីតអាមីណូ HBTU/phosphorylated ត្រូវបានគេប្រើជាទូទៅដើម្បីភ្ជាប់អាស៊ីតអាមីណូ phosphorylated វិធីសាស្រ្ត HOBt/DIEA ប៉ុន្តែ peptide អាស៊ីត phosphoric កំពុងជ្រើសរើសគុណវិបត្តិនៃវិធីសាស្រ្តនេះ ជាពិសេសនៅក្នុង peptide peptides ដែលបង្កើតបានយូរជាង ឬអាស៊ីតអាមីណូផូស្វាត ការតភ្ជាប់ប្រសិទ្ធភាពទាប ទាប។ ភាពបរិសុទ្ធនៃផលិតផលចុងក្រោយ។សម្រាប់ phosphopeptide នេះ យើងបានពិចារណាវិធីសាស្រ្តក្រោយ phosphorylation ជ្រើសរើស។ដំណើរការបង្កើតគឺជាការដកចេញនូវក្រុមការពារខ្សែសង្វាក់ចំហៀងនៃអាស៊ីតអាមីណូ ដែលចាំបាច់ត្រូវដាក់ស្លាកបន្ទាប់ពីការសំយោគ peptide ។សម្រាប់ Tyr, Thr អាចប្រតិកម្មដោយផ្ទាល់ដោយប្រើអាស៊ីតអាមីណូជាមួយនឹងខ្សែសង្វាក់ចំហៀងដែលមិនបានការពារ។-Ser (trt) ដកចេញជាបរិមាណនៅបរិយាកាស 1% TFA / DCM ។
Phosphorylation ជាមួយនឹង phosphorylation benzene ទ្វេដង phosphoramide និងអាសូតចំនួនបួនត្រូវបានបង្កើតហើយ phosphoramide tetrazolium អន្តរការីសកម្មភ្ជាប់ទៅនឹងអ៊ីដ្រូសែនបន្ទាប់មកនៅក្រោមការបង្កើតអុកស៊ីតកម្ម peroxide អាស៊ីត phosphoryl ប្រតិកម្មពេញលេញ។
នាពេលបច្ចុប្បន្ននេះ វិធីសាស្ត្រកែប្រែ peptide phosphorylated មានពីរប្រភេទធំៗ៖
(1) ការណែនាំដោយផ្ទាល់នៃអាស៊ីតអាមីណូ phosphorylated ដែលត្រូវបានធានាកម្រិតមធ្យមទៅក្នុងលំដាប់ polypeptide;
(2) បន្ទាប់ពីជ័រដែលបានបង្កើតនៅលើលំដាប់ peptide ទៅ Ser, Tyr, ឬ Thr phosphorylation នៃ side chain hydroxyl ។
1) នឹងធានាកម្រិតមធ្យមអាស៊ីតអាមីណូ phosphorylated ណែនាំដោយផ្ទាល់នូវលំដាប់ peptide:
នោះគឺអាស៊ីតអាមីណូដែលត្រូវការ phosphorylated នឹងត្រូវបាន phosphorylated និងការពារយ៉ាងត្រឹមត្រូវជាមុនដោយប្រើ (Thr, Ser ឬ Tyr) ហើយបន្ទាប់មក phosphorylation នឹងត្រូវបានបង្រួមទៅចំណុចជ្រើសរើសនៃសន្ទស្សន៍ polypeptide ដោយផ្អែកលើដំណើរការបង្កើត SPPS ធម្មតា។ .វិធីសាស្រ្តនេះគឺមានភាពងាយស្រួលក្នុងប្រតិបត្តិការបានក្លាយទៅជាវិធីសាស្រ្តសំខាន់នៃសហគ្រាស peptide កែប្រែ phosphorylated ។
2) បន្ទាប់ពីជ័រដែលបានបង្កើតនៅលើលំដាប់ peptide ទៅ Ser hydroxy phosphorylation, Tyr, ឬ Thr side chains:
ការតុបតែង phosphorylation ដោយប្រើ phosphorylation នៃការកន្ត្រាក់តែមួយចូលទៅក្នុងវិធីសាស្រ្ត polypeptide ដោយសារតែឧបសគ្គ steric ដែលបង្កើតឡើងដោយក្រុមធំនៅក្នុងការតុបតែងខ្សែសង្វាក់ចំហៀងវាពិបាកសម្រាប់ phosphorylation នៃអាស៊ីតអាមីណូដើម្បីរួញជាមួយនឹងខ្សែសង្វាក់ peptide ។នៅពេលអនាគតការណែនាំនៃអាស៊ីតអាមីណូនឹងកាន់តែពិបាកជាពិសេសនៅក្នុងការតុបតែងដែលមានកន្លែង phosphorylation ច្រើនជំនាន់នឹងក្លាយជាការលំបាកខ្លាំងណាស់សមាសភាពផលិតផលចុងក្រោយគឺស្មុគស្មាញពិបាកបំបែកហើយទិន្នផលគឺទាបបំផុត។
ដូច្នេះនៅពេលដែលកន្លែងជាច្រើននៅក្នុងខ្សែសង្វាក់ peptide ត្រូវបាន phosphorylated មនុស្សម្នាក់អាចជ្រើសរើសដើម្បីបង្កើតលំដាប់ peptide នៅលើជ័រ ហើយបន្ទាប់មក phosphorylate វាដោយក្រុម hydroxyl ខ្សែសង្វាក់ចំហៀងនៃ Ser, Tyr, ឬ Thr: ជំនាន់របស់វាភាគច្រើនពាក់ព័ន្ធនឹងការដកយកចេញនូវការជ្រើសរើស។ ក្រុមការពារខ្សែសង្វាក់ចំហៀងដែលតម្រូវឱ្យមានការទទួលស្គាល់អាស៊ីតអាមីណូបន្ទាប់ពីការសំយោគ peptide ។សម្រាប់ Tyr, Thr អាចប្រើដោយផ្ទាល់នូវខ្សែសង្វាក់ចំហៀងអាស៊ីតអាមីណូមិនត្រូវបានការពារក្នុងការឆ្លើយតបទេ។
មូលដ្ឋានការពារខ្សែសង្វាក់ចំហៀង 1% បរិយាកាស TFA/DCM អាចដកចេញជាបរិមាណ។នៅពេលជ្រើសរើសវិធីសាស្ត្រនេះ សារធាតុសកម្ម phosphoramidite tetrazolium កម្រិតមធ្យមអាចបង្កើតបានដោយប្រើ dibenzyl phosphoramidite និង tetrazolium ដែលភ្ជាប់ទៅនឹងក្រុម hydroxyl ហើយបន្ទាប់មក oxidized ដើម្បីបង្កើតជាក្រុម phosphoryl នៅក្នុងបរិយាកាស peroxyacid ដើម្បីបញ្ចប់ប្រតិកម្ម។
ពេលវេលាផ្សាយ៖ ថ្ងៃទី ០៨ ខែកញ្ញា ឆ្នាំ ២០២៣