បច្ចេកវិទ្យា FRET peptide

ការផ្ទេរថាមពលអនុភាពហ្វ្លុយអូរីសិន (FRET)

ការផ្ទេរថាមពលអនុភាពហ្វ្លុយរ៉េសសេន (FRET) គឺជាដំណើរការផ្ទេរថាមពលដែលមិនមានវិទ្យុសកម្ម ដែលថាមពលរដ្ឋរំភើបចិត្តរបស់ម្ចាស់ជំនួយត្រូវបានផ្ទេរទៅកាន់ស្ថានភាពរំភើបរបស់អ្នកទទួល តាមរយៈអន្តរកម្មនៃគូស្វាមីភរិយាអគ្គិសនីអន្តរម៉ូលេគុល។ដំណើរការ​នេះ​មិន​ជាប់​ពាក់ព័ន្ធ​នឹង photons ហើយ​ដូច្នេះ​មិន​មាន​វិទ្យុសកម្ម។ការវិភាគនេះមានគុណសម្បត្តិគឺលឿន រសើប និងសាមញ្ញ។

FRET肽技术

ថ្នាំជ្រលក់ដែលប្រើក្នុងការវិភាគ FRET អាចដូចគ្នាបេះបិទ។ប៉ុន្តែនៅក្នុងកម្មវិធីភាគច្រើន ការជ្រលក់ពណ៌ផ្សេងគ្នាត្រូវបានប្រើប្រាស់យ៉ាងពិតប្រាកដ។សរុបមក ការផ្ទេរថាមពលពន្លឺចាំងពន្លឺ គឺជាការផ្ទេរគូនៃឌីប៉ូលពីអ្នកបរិច្ចាគ (ជ្រលក់ពណ៌ 1) ទៅកាន់អ្នកទទួល (ជ្រលក់ពណ៌ 2) នៅពេលដែលក្រុមអ្នកផ្តល់ជំនួយរំភើប។ជាទូទៅ វិសាលគមនៃការបំភាយនៃក្រុម Donor fluorophore ត្រួតលើគ្នាជាមួយនឹងវិសាលគមស្រូបនៃក្រុមអ្នកទទួល។"នៅពេលដែលចម្ងាយរវាង fluorophores ទាំងពីរគឺសមរម្យ (10 - 100 A) ការផ្ទេរថាមពល fluorophore ពីម្ចាស់ជំនួយទៅអ្នកទទួលអាចត្រូវបានអង្កេត។"វិធីសាស្រ្តនៃការផ្ទេរថាមពលអាស្រ័យលើរចនាសម្ព័ន្ធគីមីរបស់អ្នកទទួល:

1. ត្រូវបានបំប្លែងទៅជារំញ័រម៉ូលេគុល ពោលគឺពន្លឺភ្លឺនៃការផ្ទេរថាមពលបាត់។(អ្នកទទួលគឺជាឧបករណ៍ពន្លត់ពន្លឺ)

2. ការបំភាយគឺខ្លាំងជាង receptor ខ្លួនវា ដែលបណ្តាលឱ្យមានការផ្លាស់ប្តូរពណ៌ក្រហមនៅក្នុងវិសាលគម fluorescence បន្ទាប់បន្សំ។"(អ្នកទទួលគឺជាអ្នកបញ្ចេញពន្លឺ)។

ក្រុមអ្នកផ្តល់ជំនួយ (EDANS) និងហ្សែនអ្នកទទួល (DABCYL) មានទំនាក់ទំនងស្មើៗគ្នាទៅនឹងស្រទាប់ខាងក្រោមធម្មជាតិនៃប្រូតេអុីនអេដស៍ ហើយនៅពេលដែលស្រទាប់ខាងក្រោមមិនត្រូវបានផ្តាច់ DABYL អាចទប់ទល់នឹង EDANS ហើយបន្ទាប់មកក្លាយជាសារធាតុហ្វ្លុយអូរីនដែលមិនអាចរកឃើញបាន។នៅពេលផ្តាច់ប្រូតេអុីនអេដស៍-1 EDANS លែងត្រូវបានពន្លត់ដោយ DABCYL ហើយ EDANS Luciferases អាចត្រូវបានរកឃើញជាបន្តបន្ទាប់។ភាពអាចរកបាននៃ protease inhibitors អាចត្រូវបានត្រួតពិនិត្យដោយការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងអាំងតង់ស៊ីតេ fluorescence នៃ EDANS ។

FRET肽技术 ២

FRET peptides គឺជាឧបករណ៍ងាយស្រួលសម្រាប់សិក្សាពីភាពមិនជាក់លាក់នៃ peptidase ។ដោយសារដំណើរការប្រតិកម្មរបស់វាអាចត្រូវបានត្រួតពិនិត្យជាបន្តបន្ទាប់ វាផ្តល់នូវវិធីសាស្រ្តដ៏ងាយស្រួលមួយសម្រាប់ការរកឃើញសកម្មភាពអង់ស៊ីម។ពន្លឺដែលផលិតបន្ទាប់ពី hydrolysis នៃចំណង peptide ដោយអ្នកផ្តល់/អ្នកទទួលផ្តល់នូវរង្វាស់នៃសកម្មភាពអង់ស៊ីមនៅកំហាប់ nanomolar ។នៅពេលដែល FRET peptide គឺនៅដដែល វាបង្ហាញពីការបាត់ភ្លាមៗនៃពន្លឺខាងក្នុង ប៉ុន្តែនៅពេលដែលចំណង peptide ណាមួយដែលទល់មុខអ្នកផ្តល់ជំនួយ/អ្នកទទួលដាច់ វាបញ្ចេញពន្លឺដែលអាចត្រូវបានរកឃើញជាបន្តបន្ទាប់ ហើយសកម្មភាពអង់ស៊ីមអាចត្រូវបានកំណត់បរិមាណ។


ពេលវេលាបង្ហោះ៖ ថ្ងៃទី ១៤ ខែសីហា ឆ្នាំ ២០២៣